间苯二酚碱性品红染色

染色机制：

间苯二酚碱性品红与铁形成一种很深的色淀复合物，其游离的氨基与弹性纤维内的氢键牢固结合呈紫蓝色。该颜色不易脱色，并能很好保存。

染色应用：

弹力纤维广泛分布于身体各处，特别在动脉壁、肺泡壁和皮肤最为丰富。

此法可以清楚地将组织内细小的弹力纤维显示出来。

弹力纤维染色可以显示皮肤组织中弹力纤维的变化，如弹力纤维痣、皮肤环状肉芽肿、硬度病等；显示不判定心内膜及动脉的病变，观察某些病变中是击伴有弹力纤维的增生或破坏;还可鉴别肿瘤组织成分如弹力纤维瘤，经弹力纤维染色后，可清晰见到瘤体内弹力纤维球。

实验步骤：

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ 20min-二甲苯Ⅱ 20min-无水乙醇Ⅰ 5min-无水乙醇Ⅱ 5min-75%酒精5min，自来水洗。

2、氧化：酸化高孟酸钾（高孟酸钾：硫酸=1:1混合）氧化5min，自来水洗。

3、漂白：草酸溶液漂白1~2min，至无色，流水冲洗2min，95%的乙醇稍浸洗。

4、间苯二酚碱性品红染色：切片入间苯二酚品红染液中浸染并加盖，室温下3～4h，流水冲洗。

5、背景分化：盐酸酒精分化至无染液脱下，弹力纤维清晰的紫红色，背景淡紫或近乎无色。

6、复染VG：将饱和kuweisuan与酸性品红9：1混合成VG染液，染1~3min，快速水洗，无水乙醇三缸快速脱水。

7、透明封片：干净的二甲苯透明1~5min，中性树胶封片。

8、显微镜镜检，图像采集分析。

染色判读：弹力纤维紫红色，胶原纤维红色，背景其他成分黄色。

注意事项：VG复染过程中水洗要快，防止红色褪掉，无水乙醇也要快洗，防止黄色变暗。

染色结果：弹力纤维呈紫色，胶原纤维呈红色，背景其他成分呈黄色。