细胞运动

细胞划痕

时间:2022-9-15 15:10:53

细胞划痕实验是实验室分析细胞运动能力的一种方法。

原理:

当细胞长到融合成单层状态时,在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。

划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。

优点:

1、在一定程度上模拟了体内细胞运动的过程。

2、非常适合研究细胞与胞外基质(ECM),细胞与细胞之间相互作用引起的细胞运动。

3、与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容,可用于分析细胞间的相互作用。

4、研究细胞运动的体外实验中最简单的方法。

实验仪器:

超净工作台、CO2培养箱、生物倒置显微镜、6孔板、马克笔、直尺、微升枪头、无血清培养基、PBS。

实验流程:

1.先用马克笔在6孔板背后,大约每隔0.5~1cm划一道横线,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。

2.在空中加入约5✖105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。

3.第二天用枪头比着直尺,尽量垂直于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。

4.用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。

5.放入37度5%CO2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。