siRNA敲减

siRNA 即小干扰核糖核酸（small interfering RNA），指一类长约21-23nt的双链RNA分子，一般3'端有两个游离的碱基，通过RNA干扰途径沉默目标基因。

利用短寡核苷酸 siRNA 或能够转录 siRNA 的 DNA 质粒将双链 RNA (dsRNA) 引入细胞。

细胞中的 Dicer 蛋白将 dsRNA 消化为 21 bp 的 dsRNA (siRNA)。

siRNA 被整合到 RNA 诱导沉默复合体 (RISC) 中。

在 RISC 复合体中，dsRNA 发生链分离。

siRNA敲减包括pcr验证和WB验证。

原理：

包括siRNA导入优化和质粒转染优化。

由于siRNA和RNA干扰载体都需要转入细胞才能发挥作用。

因此如何高效地将RNA干扰产品转入细胞是成功进行RNA干扰实验的关键步骤。

汇霖泽谷有专业的siRNA和质粒转染技术，可以对转染效率进行优化，提升RNA干扰效果。

流程：

1）培养细胞 

2）优化转染条件：在荧光显微镜下观察转染效率或者用流式细胞检测评估转染效率。 

3）根据靶基因序列设计一组RNA干扰序列。 

4）采用荧光定量PCR或Western blot评估RNA干扰效率。 

5）用相应抗生素筛选稳定表达shRNA或miRNA的细胞株。